실험 전에 모든 시약과 샘플은 실온에 맞춰야 합니다. 다시 녹인 후 샘플을 다시 원심분리하고 상층액을 취하여 테스트해야 합니다. 시약 또는 시료 준비를 위해 혼합하고 거품이 생기지 않도록 합니다. 교정 및 샘플은 중복 테스트를 위해 권장됩니다.

1. 추가: 표준 작업 용액을 처음 두 웰에 차례로 추가하고 작업 용액의 각 농도, 100에 대해 두 개의 구멍을 추가합니다. μ 각 웰의 L. 테스트할 샘플을 다른 웰에 추가, 100 μ 웰당 L(시험 범위 이상의 시료 농도, 표준 및 시료 희석액으로 희석된 시료). 마이크로플레이트를 필름 코팅하고 37℃에서 배양하였다. ℃ 90분 동안 팁: 샘플을 마이크로플레이트 바닥에 추가할 때 기포가 생성되지 않도록 구멍 벽을 만지지 말고 부드럽게 흔들고 혼합하십시오. 추가시간은 10분 이내로 조절해야 한다.

2. 비오티닐화된 항체/항원: 액체를 버리고 세척하지 않고 흔들어 건조시킵니다. 100 μL의 비오티닐화된 항체/항원 작동 용액을 각 웰에 즉시 첨가하고 혼합하고 마이크로플레이트 플러스 필름 코팅하고 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션했습니다.

3. 세척: 구멍의 액체를 흔들어 각 웰에 350μL의 세척액을 추가하고 1-2분 동안 담가 마이크로플레이트의 액체를 빨아들이거나 털어내고 두꺼운 흡수지 위에서 두드려 건조시킵니다. 이 세척판 단계를 3회 반복합니다. 팁: 세탁기는 여기와 다른 세탁 단계에서 사용할 수 있습니다. 세척의 각 단계는 실험에 필수적입니다.

4. HRP 효소 접합체: 100 μ 웰당 L 효소 컨쥬게이트 작업 용액, 혼합, 필름 코팅, 37℃에서 인큐베이션 ℃ 30분 동안.

5. 세척: 웰의 액체를 버리고 3단계와 동일한 방법으로 플레이트를 5회 세척합니다.

6. 기질: 90 μL의 기질 용액(TMB)을 각 웰에 첨가하고 잘 섞은 후 필름 코팅을 추가하고 37℃에서 약 15분 동안 배양한다. 참고: 인큐베이션 시간은 실제 발색 상황에 따라 줄이거나 늘려야 하지만 30분을 넘지 않아야 합니다. 표준 구멍에 명확한 구배가 나타나면 종료할 수 있습니다.

7. 종료: 50 추가 μ 반응을 종료하기 위해 각 웰에 종료 용액 L. 참고: 종결 용액의 첨가 순서는 기질 용액의 첨가 순서와 같아야 합니다.

8. 읽기: 마이크로플레이트 판독기로 450nm에서 각 웰의 광학 밀도(OD)를 즉시 측정합니다. 테스트 절차를 설정하려면 미리 마이크로플레이트 판독기를 열어야 합니다.

9. 실험 후 사용하지 않은 시약은 유통기한까지 지정된 보관온도에 따라 냉장고에 다시 넣어주세요.