데스크탑 저속 동결 원심분리기에 의한 세포질 및 핵 단백질 추출을 위한 원심분리의 세부 단계

게시자 관리자 | 23 Mar

탁상용 저속 동결 원심 분리기는 생물학적 거대 분자, 퇴적물 등의 1차 분리 및 추출을 위해 실험실에서 사용됩니다. 스위블 헤드는 주로 평면형 및 앵글형인 알루미늄 합금으로 만들어집니다. 원심 튜브는 단단한 유리, 폴리에틸렌 경질 플라스틱 및 스테인리스 스틸 튜브로 만들어집니다. 원심 분리기는 구동 모터, 타이머, 조절기(속도 표시기) 및 냉장 시스템(조절 가능한 온도 범위는 - 20~40℃)을 갖추고 있어 용량과 회전 속도가 다른 회전 헤드를 교체할 수 있습니다. 원심 재료의 요구에.

데스크탑 저속 동결 원심분리기에 의한 세포질 및 핵 단백질 추출을 위한 원심분리의 세부 단계:

1. 세포 성장 상태를 결정합니다. 세포 성장 상태는 80% 이상이어야 합니다.

2. 1500r/min에서 5분간 원심분리기

3. 상등액을 버리고 동량의 차가운 PBS로 세포를 씻어내고 2번과 같이 3회 반복한다.

4. 예상 침전량에 따라 세포 입자에 isotonicly sisbuffer 부피의 5배를 추가하여 세포가 부드럽게 부유하고 가능한 한 거품을 피하도록 합니다.

5. 현탁된 세포에 lysisbuffer를 첨가하고 15분 동안 얼음 위에 두어 세포가 확장되도록 합니다. 이는 현미경으로 확인할 수 있습니다.

6. 세포 실험에서 확장된 세포는 10% IGEPALCA-630을 첨가하여 최종 농도가 0.3%가 되도록 잘 섞은 후 천천히 첨가합니다.

7. 즉시 원심분리(1.5ml EP tube를 5500r/min에서 30초 동안 대량으로 사용, 50ml 튜브를 5500r/min에서 2분 동안 대량으로 사용)

8. 상등액(세포질 단백질)을 새로운 동결 튜브로 옮김

9. 등장액 완충액에 현탁 입자 부피의 5배로 세포를 현탁하고 잘 섞는다.

10. 세포 현탁액을 1500r/min에서 5분간 원심 분리하고 상층액을 제거합니다.

11. 추출 버퍼 부피의 2/3배로 입자를 부유

12. 튜브를 진동 믹서에 놓고 700r/min에서 15분간 흔든 다음 1400r/min에서 15분간 혼합합니다. 전체 공정은 거품을 피하기 위해 주의해야 합니다.

13. 9400r/min에서 15분간 원심분리하고, 상층액을 저온원심분리 후 새 냉동 원심분리기 튜브로 옮긴다.

14.여러개로 나누어 액체질소로 냉동보관(장기보관시 -80℃, 단기보관시 -20℃)

웹 메뉴

제품 검색

언어

종료 메뉴

소식