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효소 라벨판의 분류 및 성능판정

게시자 관리자 | 26 Dec

ELISA 검출 실험에서 보조물질로 사용되는 Enzyme 그릇 결정적인 역할을 하며 최종 실험 결과에 직접적인 영향을 미칩니다. 품질 효소판 주로 단백질 흡착에 대한 민감도, 플레이트와 홀 사이의 단백질 흡착 용량의 차이, 구입한 배치 간의 차이에 따라 달라집니다. 효소 플레이트 . 따라서 효소 플레이트 높은 단백질 흡착 감도를 가진 제품, 단백질 흡착 용량의 구멍 사이의 작은 차이 및 배치 사이의 작은 차이는 실험자가 신뢰할 수 있고 안정적인 실험 결과를 얻을 수 있도록 보장합니다.

효소판 분류: 다른 분류 기준에 따라, 접시에는 다른 분류.

1: 홀 수에 따라 96홀, 48홀 등으로 나눌 수 있습니다. 효소 플레이트 주로 마이크로플레이트 판독기와 함께 사용되며, 그릇 시중의 미터는 기껏해야 96홀이므로 마이크로플레이트는 96홀입니다.

2: 다른 바닥에 따라 평평한 바닥, U 바닥, V 바닥 등으로 나뉩니다.

편평한 베이스의 굴절률이 낮아 마이크로플레이트에서 검출하기에 적합합니다.

그는 U 마이크로플레이트 굴절률이 높고 샘플링, 샘플링 및 혼합에 편리하며 마이크로플레이트에 놓지 않고 색상 변화를 직접 관찰하여 해당 면역 반응이 있는지 여부를 확인할 수 있습니다.

V 베이스의 마이크로플레이트는 시료를 정확하게 흡수할 수 있습니다.

삼: 마이크로 플레이트와 단백질 및 기타 분자의 다른 결합 능력에 따라 높은 결합력, 중간 결합력 및 아미노화로 나뉩니다.

(1) 높은 결합력

이 마이크로플레이트의 표면 후 단백질 결합 능력이 크게 향상되어 최대 300~400ng IgG/cm2이며 주요 결합 단백질의 분자량은 > 10kD입니다. 이 등급의 마이크로플레이트를 사용하면 감도를 향상시킬 수 있고 코팅된 단백질의 농도와 양을 상대적으로 줄일 수 있어 비특이적 반응을 일으키기 쉽습니다. 항원 또는 항체로 코팅한 후 비이온성 세제는 결합되지 않은 단백질 부위를 효과적으로 밀봉할 수 없으므로 단백질을 밀봉제로 사용해야 합니다.

(2) 중간 구속력

이러한 마이크로플레이트 플레이트는 표면의 소수성 결합을 통해 단백질에 수동적으로 결합하고, 200 내지 300ng IgG/cm2의 단백질 결합 용량을 갖는 분자량 > 20kD를 갖는 거대분자 단백질에 대한 고체상 캐리어로서 적합하다. 거대 분자에만 결합하는 특성으로 인해 비정제 항체 또는 항원으로서 비특이적 교차 반응 가능성을 줄이기 위한 고상 운반체에 적합합니다. 플레이트는 비활성 단백질 또는 밀봉 용액으로서의 비이온성 세제일 수 있습니다.

(삼) 아민화

표면 개질 후 이 마이크로플레이트는 소수성 결합이 친수성 결합으로 대체된 양전하를 띤 아미노기를 가집니다. 이 등급의 마이크로플레이트는 소분자 단백질의 고상 캐리어로 적합합니다. 적절한 완충액과 pH를 사용하여 표면은 이온 결합을 통해 음전하를 띤 소분자와 결합합니다. 표면의 친수성과 다른 가교제에 의해 공유 결합되는 능력으로 인해 Triton-100, Tween 20 등과 같은 오염 제거제에 용해되는 단백질 분자를 고정하는 데 사용할 수 있습니다. 이 플레이트의 결함은 감소된 소수성 때문에; 또한 표면을 효과적으로 닫아야 합니다. 친수성 및 공유 결합 표면 특성으로 인해 사용되는 밀봉 용액은 비반응성 아미노 그룹 및 선택된 가교제의 모든 작용기와 상호 작용할 수 있어야 합니다.

4. 색상에 따라 투명, 검정, 흰색으로 나눌 수 있습니다.

Transparent는 가장 일반적인 효소결합 면역 실험에 가장 많이 사용되는 방법입니다. 투명 마이크로플레이트와 달리 Relcontrast에는 발광 감지를 위한 불투명 마이크로플레이트(일반적으로 흑백)도 있습니다. 검은색 마이크로플레이트 자체가 빛을 흡수하기 때문에 신호가 흰색 마이크로플레이트보다 훨씬 낮기 때문에 일반적으로 형광 검출과 같은 강한 빛을 감지하는 데 사용됩니다. 백색 마이크로플레이트는 미약광 검출에 사용되며 일반적인 화학발광에 자주 사용됩니다. 또한 검은색 마이크로플레이트는 비특이적 반응의 문제도 약화시킬 수 있습니다. 동시에 화학발광 반응에서 방출되는 빛은 등방성이기 때문에 일반적인 마이크로플레이트에서는 발광 감지가 불가능하다는 점에 유의해야 합니다. 또한 수평 방향에서 구멍과 구멍 벽 사이의 틈을 통해 빛을 쉽게 만들어 구멍의 광 흡수 값의 빛이 인접한 구멍 방출 빛의 영향을 받습니다.

우수한 마이크로플레이트는 우수한 흡착 성능, 낮은 블랭크 값, 구멍 바닥의 높은 투명도, 플레이트 간 및 동일한 플레이트의 구멍 간 성능이 유사해야 합니다. 원료의 차이와 생산 공정의 차이로 인해 다양한 제품의 품질이 매우 다르기 때문에 마이크로플레이트 각 배치의 성능을 미리 확인하고 사용해야 합니다. 일반적으로 사용되는 검사 방법은 일정 농도의 human IgG(일반적으로 10 ng/ml)를 ELISA plate well에 코팅한 후 세척 후 각 well에 효소 표지된 anti-human IgG 항체를 적당 희석액을 첨가하여 보온 후 세척하고, 기질색을 첨가하고 효소반응을 정지시킨 후 각각의 웰에서 용액의 흡광도를 측정한다. 각 웰의 판독값이 약 0.8의 흡광도로 유지되도록 반응 조건을 제어하였다. 총 판독값의 평균을 계산했습니다. 모든 개별 판독값과 모든 판독값의 평균 차이는 10% 미만이어야 합니다. 다음 세 개의 마이크로플레이트는 예를 들어 A, B 및 C입니다.

직접법: 마이크로플레이트 표면에 Human IgG 흡착 여부 검출

이중항체샌드위치법 : 항인간항체에 양성인 혈청내 항원

위의 그림에서 알 수 있듯이 이 세 가지 유형의 바이오 효소 플레이트에서 클래스 A 마이크로플레이트는 단백질 흡착 효과가 더 우수할 뿐만 아니라 단백질 흡착 감도를 향상시켜 보다 신뢰할 수 있는 실험 데이터를 제공할 수 있습니다. 또한 배치 차이의 접시에 대해 문의하실 수 있습니다. 다음은 특정 플레이트의 배치 차이입니다. 배치 내 차이 데이터 차트에서 볼 수 있듯이 마이크로플레이트는 배치 간 안정성이 우수하고 배치 내 변동 계수(CV) 차이는 약 5.0%로 배치 내 변동 계수보다 훨씬 낮습니다. 임상면역반응 품질관리기준 10.0% 이하 따라서 ELISA 실험에도 적합합니다.

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