아르 자형 생태

1. 동결된 튜브를 액체질소에서 꺼내 즉시 37℃ 수조에 넣고 가볍게 흔들어 줍니다. 액체가 녹은 후(약 1~1.5분) 알코올을 조금 꺼내어 초청정 작업대에 올려 놓습니다.

2. 세포 현탁액을 10ml 배지가 담긴 15ml 원심분리 튜브에 넣고(냉동된 튜브를 배지로 세척하고 벽에 붙은 모든 세포를 세척) 1000에서 5분간 원심분리합니다.

3. 상등액을 뒤집어 배지 1ml를 첨가하여 세포를 현탁시켰다. 10ml의 배지와 함께 10cm 접시에 훈제하고 부드럽게 좌우로 흔들어 접시에 세포가 고르게 분포되도록 합니다.

4. 세포의 종류와 날짜, 사람의 이름 등을 표시하고 CO2 인큐베이터에 넣고 세포를 붙이고 배지를 바꾼다.

5. 배지는 3일에 한 번씩 갈아주었다.

피 암살하다

1. 식물을 80-90% 피복률에 도달하도록 계대하였다.

2. 원래 매체를 어업 .

3. 적절한 트립신(세포를 덮음)을 추가하고 1-2분 동안 분해합니다. .

4. 동량의 혈청 함유 배지를 첨가하여 소화를 종료하였다. .

5. 피펫 총으로 세포를 불어서 모두 정지 상태로 두십시오.

6. 세포를 15ml 원심분리관에 흡인하고 1000℃에서 5분 동안 원심분리하였다.

7. 상등액을 붓고 배지 1~2ml를 넣어 모든 세포를 날려버린다.

8. 세포는 세포 종에 따라 여러 배양 접시에 전달되었습니다. 일반적으로 암세포는 5개의 세포로 나뉘고 3개의 정상 세포가 유전된다. 계속 재배하십시오.

자유롭게 세포를 분해하고 원심분리합니다(ibid. 위).

일치하는 냉동 보관 용액으로 세포를 현탁하고 멸균된 냉동 튜브에 나누어 몇 분 동안 방치하고 세포 유형과 냉동 보관 날짜를 지정합니다. 4℃ 30분, -20℃ 30분, -80℃ 하룻밤, 그리고 그런 다음 액체 질소 관류에 저장됩니다.

동결 보존 용액의 제조: 70% 배지 20% FBS 10% DMSO. DMSO는 천천히 첨가하고 꾸준히 흔들어야 합니다.